OVCAR-3人卵巢腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Phospho-c-Fos (Thr325)： 0酸化c-fos抗體 大鼠腎臟管狀上皮細(xì)胞(RRTEpiC)(5×105)

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B 兔子Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA 試劑盒 IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

FIH1： 缺氧誘導(dǎo)因子1α抑制蛋白抗體 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich 小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 兔子Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

F1 operon positive regulatory protein(NT)： 肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體 人心臟成纖維細(xì)胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg

MVD： 甲羥脫羧酶抗體 VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CL-0329Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 IAA(Mouse insulin autoantibodies)  小鼠胰島素自身抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1

NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A10(大鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞) 大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒 ICAM-2/CD102(Human intercellular adhesion molecule 2)  人細(xì)胞間粘附分子2 96T

MHC class I： 組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4

IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) 大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)ELISA試劑盒 ICAM-3/CD50(Human intercellular adhesion molecule 3)  人細(xì)胞間粘附分子3 96T

OVCAR-3人卵巢腺癌細(xì)胞Phospho-HSP90 alpha (Thr5 + Thr7)： 0酸化熱休克蛋白90α抗體 CM-M002小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

HA細(xì)胞，人羊膜細(xì)胞 產(chǎn)氣腸桿菌 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3 人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA 試劑盒 IFITM1 (interferon induced transmembrane protein 1) 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗原 0.5mg

Phospho-Histone H2A.X (Ser139)： 0酸化組蛋白H2AX抗體 IL18RAP Others Human 人 IL18RAP / IL1R7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA 試劑盒 human IFN- Alpha (Interferon Alpha ) 干擾素-α抗原(人) 0.5mg

Phospho-Histone H3 (Ser28)： 0酸化組蛋白H3抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0920

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。