NCI-H2228人非小細胞肺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

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GNRHR2： 促性腺素釋放激素受體2抗體 SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞 Human

A-431(人表皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纖維細胞培養(yǎng)基100mL 人羊膜細胞;HA 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA 試劑盒 IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

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KATO III(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 試劑盒 IgM/APC APC標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

G1switch 2： G0/G1期開關調節(jié)蛋白2抗體 SLC27A4 Others Human 人 SLC27A4 / FATP4 人細胞裂解液 (陽性對照)

大額牛皮膚細胞;BFR-S3 大鼠內皮素(ET-1)ELISA試劑盒 Human Oncogene Protein p190/bcr-abl  人癌基因蛋白質p190/bcr-abl 96T

NMS： 神經(jīng)調節(jié)肽S抗體 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

人食道上皮細胞(HEEC)(5×105 ) RN-c, 大鼠皮質神經(jīng)元 Rattus 大鼠內皮素(ET)ELISA 試劑盒 BTA(Human Bladder tumor antigen)  人膀胱抗原 96T

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NCI-H2228人非小細胞肺癌細胞LS 180(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 原代上皮細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml 霉毒素(Aflatoxin)ELISA 試劑盒 CD68 CD68(多肽抗原) 0.5mg

ERG/KCNH2： 特異性離子通道蛋白抗體 HUVEC, 人臍靜脈內皮細胞

EFNB2 Protein Human  Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽) 貓細小病毒抗體(FPV)ELISA 試劑盒 ChAT(Choline Acetyltransferase) 乙酰轉移酶(抗原) 0.5mg

KIF4A： 沉默驅動蛋白KIF4A抗體 PDE3A Others Human 人 PDE3A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人神經(jīng)小膠質細胞培養(yǎng)基 100mL 貓α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 CD36L1/SRB1 高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗原 0.5mg

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。